胰酶消化的原理
胰酶是一种蛋白酶,通过在特定位置上降解蛋白,可使细胞膜上与培养皿壁结合处蛋白降解,从而使两者分离。加入完全培养基后可终止消化:因为完全培养基里有血清,而血清里有蛋白,过量的血清蛋白与胰酶结合,竞争性抑制,使胰酶无暇消化细胞蛋白。
操作步骤
1.弃除旧培养基(用PBS润洗2-3遍后要用枪头将残余液体吸除干净,否则会影响细胞消化)再加入铺满皿底的胰酶进行消化,直至细胞处于悬浮状态。
2.放入环境为37℃、5%二氧化碳的培养箱中2-3分钟
3.加入3ml10%的完全培养基并吹打均匀,终止消化